檢驗標(biāo)本的采集 

一、血液標(biāo)本的采集 
血液標(biāo)本可來自于靜脈、動脈或毛細(xì)血管。靜脈血是最常用的標(biāo)本，靜脈穿刺是最常用的采血方法。毛細(xì)血管采血主要用于兒童，血氣分析多使用動脈血。 
（一） 靜脈采血法 
1 ．采血步驟 
采血前核對病人姓名、性別、年齡、編號及檢驗項目等，按試驗項目要求，準(zhǔn)備好相應(yīng)的容器，如空白試管、抗凝管或促凝管等。病人應(yīng)取坐位或臥位，采血部位通常是前臂肘窩的正中靜脈。若用普通采血法，采血后應(yīng)取下針頭，將血液沿管壁緩慢注入試管內(nèi)。 
2 ．注意事項 
（ 1 ） 防止溶血：造成溶血的因素有注射器和容器不干燥、不清潔；淤血時間過長；穿刺不順利，組織損傷過多；抽血速度太快；血液注入容器時未取下針頭或注入速度過快產(chǎn)生大量泡沫；震蕩過于劇烈等。若用普通注射器采血后，未取針頭直接將血注入真空管內(nèi)，也易造成溶血。體內(nèi)溶血屬合格標(biāo)本，但應(yīng)在報告單上注明。 
（ 2 ） 避免充血和血液濃縮：采血時應(yīng)動作迅速，盡可能縮短止血帶使用時間。用止血帶壓迫時間最好不超過半分鐘，否則將使生化結(jié)果升高或下降。 
（ 3 ） 若病人正在進(jìn)行靜脈輸液，不宜在輸液同側(cè)手臂采血；若女性病人做了乳腺切除術(shù)，應(yīng)在手術(shù)對側(cè)手臂采血。 
（ 4 ） 采血的體位：體位改變可引起一系列的生理變化，使血液中的許多指標(biāo)發(fā)生改變。一般采取直立位采血，其測定值比臥位高 5 ％～ 15 ％。因此，采血時要注意保持正確的體位（坐位或臥位），以及體位的一致性。 
（ 5 ） 采血時只能向外抽，決不能向靜脈內(nèi)推，以免注入空氣，形成氣栓而造成嚴(yán)重后果。 
（ 6 ） 很多生化成分受膳食影響，因此，采血前要確認(rèn)病人是否空腹。 
（二） 動脈采血法 
肱動脈、股動脈、橈動脈以及其它任何部位的動脈都可以作為采血點，但多選擇肱動脈和橈動脈。在摸到明顯搏動處，按常規(guī)消毒，左手固定搏動處，右手持注射器，針頭成 60 °角刺入，血液將自動進(jìn)入注射器內(nèi)。采血注意事項見血氣分析部分。
 
（三） 真空采血法 
雙向針的一端在持針器的幫助下刺入靜脈，另一端插入真空試管內(nèi)，血液在負(fù)壓作用下自動流入試管內(nèi)。由于在完全封閉狀態(tài)下采血，避免了血液外溢引起的污染，并有利于標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)和保存。標(biāo)準(zhǔn)真空采血管采用國際通用的頭蓋和標(biāo)簽顏色顯示采血管內(nèi)添加劑種類和試驗用途?？筛鶕?jù)需要選擇相應(yīng)的盛血試管。 
1．惰性分離膠促凝管 
紅色頭蓋，采血管內(nèi)添加有惰性分離膠和促凝劑，可激活纖維蛋白酶，使可溶性纖維蛋白變?yōu)椴豢扇艿睦w維蛋白多聚體，進(jìn)而形成穩(wěn)定的纖維蛋白凝塊。標(biāo)本離心后，惰性分離膠能夠?qū)⒀褐械囊后w成分（血清或血漿） 和固體成分（紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板、纖維蛋白等） 徹底分開并完全積聚在試管中央而形成屏障，標(biāo)本在 48 小時內(nèi)保持穩(wěn)定。促凝劑可快速激活凝血機(jī)制，加速凝血過程，常規(guī)用于血清生化、急診血清生化和血清學(xué)相關(guān)檢驗。
2 ．肝素鋰抗凝管 
綠色頭蓋，采血管內(nèi)添加有肝素鋰。肝素直接具有抗凝血酶的作用，可延長標(biāo)本凝血時間。適用于血粘度、紅細(xì)胞脆性試驗、血氣分析、紅細(xì)胞壓積試驗、血沉及普通生化測定，不適于做血凝試驗。過量的肝素會引起白細(xì)胞的聚集，不能用于白細(xì)胞計數(shù)。因其可使血片染色后背景呈淡藍(lán)色，故也不適于白細(xì)胞分類。 
3  E DT A 抗凝管 
紫色頭蓋，乙二胺四乙酸（ E DT A ，分子量 292 ） 及其鹽是一種氨基多羧基酸，可以有效地螯合血液標(biāo)本中的鈣離子。螯合鈣或?qū)⑩}從反應(yīng)位點移去會阻滯和終止內(nèi)源性或外源性凝血過程，從而防止血液標(biāo)本凝固。適用于一般血液學(xué)檢驗，不適用于凝血試驗及血小板功能檢查，亦不適用于鈣離子、鉀離子、鈉離子、鐵離子、堿性磷酸酶、肌酸激酶和亮氨酸氨基肽酶的測定及 PCR 試驗。 
4 ．枸櫞酸鈉凝血試驗管 
淺藍(lán)頭蓋，枸櫞酸鈉主要通過與血樣中鈣離子螯合而起抗凝作用。適用于凝血實驗，抗凝劑與血液的比例是 1 ∶ 9 。 
5 ．枸櫞酸鈉血沉試驗管 
黑色頭蓋，血沉試驗要求的枸櫞酸鈉濃度是 3．2 ％ （相當(dāng)于 0．109 mol／L），抗凝劑與血液的比例為 1∶4 。
6   交叉配血管 
粉紅色頭蓋，乙二胺四乙酸二鉀是一種氨基多羧基酸，可以有效地螯合血液標(biāo)本中的鈣離子。阻滯和終止內(nèi)源性或外源性凝血過程，從而防止血液標(biāo)本凝固。適用于血型和血交叉配血檢驗。
 
二、尿液標(biāo)本的采集 
（一） 采集方法 
尿液標(biāo)本有隨機(jī)新鮮尿、定時尿及 24 小時尿，根據(jù)檢查項目選擇標(biāo)本的采集類型。定量生化分析多收集 24 小時尿液， 24 小時尿標(biāo)本采集方法如下： 
囑病人在早晨 8 時排尿棄去，以后每次排尿均收集于一大容器內(nèi)，至次日早晨 8 時最后一次尿亦收集于容器內(nèi)。測量并記錄 24 小時尿液總量，然后混勻尿液，取適量尿液送檢。 
（二） 注意事項 
收集尿液標(biāo)本的容器必須清潔干燥， 最好是一次性使用的容器。若容器反復(fù)使用，則須用洗滌液和自來水清洗， 再用蒸餾水沖洗。尿標(biāo)本要防止混入月經(jīng)血、陰道分泌物、精液、前列腺液、糞便等異物。尿標(biāo)本收集后應(yīng) 12 時內(nèi)送檢，以免細(xì)菌作用和化學(xué)成分分解。若不能及時檢驗（如收集 24 小時尿液），將標(biāo)本置冰箱保存，若加入防腐劑，保存效果更佳。 
三、糞便標(biāo)本采集 
標(biāo)本的收集、存放與運(yùn)送的得當(dāng)與否，直接關(guān)系到檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。 
應(yīng)采取新鮮糞便，盛于潔凈、干燥無吸水性的有蓋容器內(nèi)，不得混有尿液、水或其他物質(zhì)，以免破壞有形成分，使病原菌死亡。污染腐生性原蟲、真菌孢子、植物種子、花粉易混淆檢驗結(jié)果。采集標(biāo)本時應(yīng)用干凈竹簽選取含有粘液、膿血等病變成分的糞便；外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材，其量至少為大拇指末段大?。s 5g ）。 
標(biāo)本采集后一般情況應(yīng)于 1h 內(nèi)檢查完畢，否則可因 p H 及消化酶等影響導(dǎo)致有形成分破壞分解。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體時應(yīng)于排便后立即送檢。從膿血和稀軟部分取材，寒冷季節(jié)標(biāo)本傳送及檢查時均需保溫。檢查日本血吸蟲卵時應(yīng)取粘液、膿血部分，孵化毛蚴時至少留取 30g 糞便，且須盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚 12 時或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。找寄生蟲蟲體及做蟲卵計數(shù)時應(yīng)采集 24h 糞便，前者應(yīng)從全部糞便中仔細(xì)搜查或過篩，然后鑒別其種屬；后者應(yīng)混勻后檢查。對某些寄生蟲及蟲卵的初步篩選檢驗，應(yīng)采取三送三檢。因為許多腸道原蟲和某些蠕蟲卵都有周期性排出現(xiàn)象。 
隱血試驗，應(yīng)連續(xù)檢查 3 天，選取外表及內(nèi)層糞便，應(yīng)迅速進(jìn)行檢查，以免因長時間放置使隱血反應(yīng)的敏感度降低。 
糞膽原定量檢查應(yīng)連續(xù)收集 3 天的糞便，每天將糞便混勻稱重后取出約 20g 送檢。查膽汁成分的糞便標(biāo)本不應(yīng)在室溫中長時間放置，以免陽性率減低。 
細(xì)菌檢驗用標(biāo)本應(yīng)全部用無菌操作收集，立即送檢。無糞便排出而又必須檢查時，可經(jīng)肛門指診或采便管拭取標(biāo)本，灌腸或服油類瀉劑的糞便常因過稀且混有油滴等而不適于做檢查標(biāo)本。 
四、分泌物的標(biāo)本采集 
1. 取材所用消毒的刮板，吸管或棉拭子必須清潔干燥，不粘有任何化學(xué)藥品或潤滑劑。 
2. 根據(jù)不同的檢查目的可自不同部位取材。一般采用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道后部、宮頸管口、尿道等處取材，制備成生理鹽水液。 
五、特殊標(biāo)本的采集 
（一） 腦脊液的采集 
正常腦脊液為無色、清亮水樣液體，當(dāng)腦組織和腦膜有病變，如感染、外傷或腫瘤時，可使腦脊液（ cerebrospinal fluid ， CSF ） 發(fā)生變化，主要反映在顏色、透明度、細(xì)胞及各種化學(xué)成分的改變。腦脊液標(biāo)本的采集由醫(yī)生進(jìn)行。腦脊液的穿刺部位較多，有腰椎穿刺、小腦延髓池穿刺，嬰兒時期的前囟門作側(cè)腦室穿刺等。因腰椎穿刺簡單易行且危險性小， 最為常用。將腦脊液標(biāo)本收集于三支無菌試管中，第 1 管作細(xì)菌檢查，第 2 管作生化檢查，第 3 管作細(xì)胞計數(shù)。腦脊液標(biāo)本應(yīng)盡量避免凝固和混入血液，標(biāo)本采集后要立即送檢，以免因標(biāo)本放置時間過長使其成分變化，如葡萄糖分解，使葡萄糖含量降低。 
（二） 漿膜腔積液的采集 
正常情況下，人體胸腔、腹腔、心包膜等有少量液體，它們主要起著潤滑漿膜的作用，當(dāng)漿膜發(fā)生病變時，如炎癥、循環(huán)障礙、惡性腫瘤浸潤等，漿膜腔液產(chǎn)生增多并積聚在漿膜腔內(nèi)，稱為漿膜腔積液。檢測漿膜腔積液的某些化學(xué)成分，如蛋白質(zhì)、葡萄糖、酶及腫瘤標(biāo)志物等，有助于了解漿膜腔積液的性質(zhì)和病因。一般由臨床醫(yī)生用漿膜腔穿刺術(shù)獲得標(biāo)本。 
六、臨床微生物學(xué)檢驗標(biāo)本的采集 
所有臨床微生物學(xué)檢驗標(biāo)本的采集均應(yīng)盡可能在使用抗生素使用之前進(jìn)行！
※膿液及創(chuàng)傷感染標(biāo)本的采集 
1 ．首先用無菌生理鹽水拭凈病灶表面的污染雜菌。 
2 ．對已破潰膿腫一般以無菌棉拭子采取膿液及病灶深部的分泌物， 而瘺管則以無菌方法采取組織碎片，放入無菌試管中送檢。 
3 ．對未破潰膿腫最好用 2．5 ％～3 ％碘酊和 75 ％ 酒精消毒患部皮膚后，以無菌注射器抽取膿汁及分泌物，也可于切開排膿時，以無菌棉拭采取。 
4 ．有時也可將沾有膿汁的最內(nèi)層敷料放入無菌平皿內(nèi)送檢。 
5 ．對放線菌的標(biāo)本， 常用無菌棉拭擠壓瘺管，選取流出膿汁中的“硫磺樣顆?！笔⒂谠嚬軆?nèi)送檢，也可將滅菌紗布塞入瘺管內(nèi)。次日取出送檢。 
※血液及骨髓標(biāo)本的采集 
1 ．將患者擬采血部位放平，扎以止血帶，選好靜脈穿刺點，以皮點為中心用 2 ．5 ％～ 3 ％碘酊從內(nèi)向外周擦拭，待干后再以同法用 75 ％乙醇脫碘。消毒范圍不得過小。 
2 ．以無菌手續(xù)由靜脈取血 5 ml ，立即注入適當(dāng)?shù)囊后w增菌培養(yǎng)基內(nèi)， 迅速輕搖，使充分混合，以防止凝固。 
※尿液標(biāo)本的采集 
采集尿標(biāo)本必須防止雜菌污染，嚴(yán)格無菌操作，一般多采集中段尿。送檢標(biāo)本以晨起第一次尿液為佳，采集后立即送檢，（泌尿系感染大多病原菌，于室溫放置時間較久，即可增殖）。
1 ．中段尿采集方法 
（ 1 ） 女性采樣前應(yīng)先用肥皂水清洗，再用 0．1％高錳酸鉀水溶液沖洗尿道口，然后排尿棄去前段尿，留取中段尿 10 ml 左右于無菌容器內(nèi)，立即送檢。 
（ 2 ） 男性須將包皮翻開沖洗，然后采集中段尿。 
（ 3 ） 兒童多數(shù)情況下僅沖洗外陰是不夠的，故采集標(biāo)本較為困難，如尿內(nèi)細(xì)菌明顯增多，可高度懷疑尿路感染。 
2 ．腎盂尿采集法 
為確定菌尿是否來自腎臟，可用導(dǎo)尿管采集腎盂尿，充分沖洗膀胱，以最后一次沖洗尿作為對照，爾后用導(dǎo)尿管插入輸尿管，分別標(biāo)記左右兩側(cè)收集 3 次尿，如輸尿管菌數(shù)比對照尿菌數(shù)多或第 3 次比第 1 次多，該菌尿可能來自腎臟；反之，第 1 次尿菌數(shù)多于第 3 次尿菌數(shù)，則可能來自膀胱。該方法一般請泌尿科醫(yī)師協(xié)助進(jìn)行。 
3 ．膀胱穿刺采集法 
采集中段尿完全避免污染是很困難的培養(yǎng)結(jié)果與病情不符時，可采用恥骨上膀胱穿刺采集尿液。此法用于厭氧菌培養(yǎng)或留尿困難嬰幼兒。 
4 ．導(dǎo)尿法 
采取導(dǎo)尿管留尿是一種較好的無菌采集方法，取 10 ～ 15 ml 于滅菌容器內(nèi)送檢。 
※糞便標(biāo)本的采集 
1 ．選取有膿血、粘液部分的糞便 2 ～ 3g ，液體糞便則取絮狀物，裝于滅菌的蠟紙盒中送檢。 
2 ．在無法獲得糞便的情況下，可用直腸拭子插入肛門 4 ～ 5cm 處，取直腸表面的粘液，裝于無菌試管或保存液中送檢。 
※上呼吸道標(biāo)本的采集 
1 ．?dāng)M檢查白喉棒狀桿菌采集標(biāo)本時， 應(yīng)使患者對光而坐，頭部上仰口張大， 用壓舌板輕輕壓舌根，直接用棉拭子擦拭病人咽、鼻粘膜、偽膜邊緣部分或組織深層的分泌物作直接涂片和分離培養(yǎng)。若無局部病變或作帶菌者檢查則應(yīng)于咽部或扁桃體上擦拭。 
2 ．?dāng)M檢查百日咳鮑特菌或腦膜炎奈瑟菌時，應(yīng)自鼻咽部采集標(biāo)本。即用無菌的鼻咽拭子（一端彎曲的金屬棉拭） 由口腔進(jìn)入伸向鼻咽部，到達(dá)咽后壁涂擦取標(biāo)本，對患百日咳患兒作標(biāo)本培養(yǎng)時可采用咳碟法。 
3 ．?dāng)M檢查麻風(fēng)分枝桿菌時， 可采取鼻粘膜標(biāo)本。即將無菌棉拭子用力擦拭鼻中隔部，直至微有出血為止。 
※痰液及下呼吸道分泌物標(biāo)本的采集 
1 ．標(biāo)本在采集前，首先讓病人用清水漱口數(shù)次，以除去口腔內(nèi)大量雜菌，讓患者用力自氣管深部咳出痰液吐至無菌的廣口瓶內(nèi)或小紙盒內(nèi)。 
2 ．若病人痰量較少，需要檢查痰中結(jié)核桿菌時，則應(yīng)收集 24 小時痰液。 
3 ．氣管洗滌液：取 8 ～ 9 號消毒導(dǎo)管，從鼻腔插入氣管內(nèi)， 緩慢注入滅菌蒸餾水 5 ml ，取出導(dǎo)管。留取病人在 3 小時內(nèi)咳出的痰液，放入滅菌瓶內(nèi)送檢，本法可在清晨空腹時進(jìn)行。 
※鼻、咽、眼、耳拭子標(biāo)本采集 
1 ．?dāng)M檢查白喉桿菌采集標(biāo)本時， 應(yīng)使患者對光而坐，頭部上仰口張大，用壓舌板輕輕壓舌根，直接用棉拭子擦拭病人咽、鼻粘膜、偽膜邊緣部分或組織深層的分泌物作直接涂片和分離培養(yǎng)。若無局部病變或作帶菌者檢查則應(yīng)于咽部或扁桃體上擦拭。 
2 ．?dāng)M檢查百日咳桿菌或腦膜炎奈瑟菌時，應(yīng)自鼻咽部采集標(biāo)本。即用無菌的鼻咽拭子（一端彎曲的金屬棉拭）由口腔進(jìn)入伸向鼻咽部，到達(dá)咽后壁涂擦取標(biāo)本，對患百日咳患兒作標(biāo)本培養(yǎng)時可采用咳碟法。
3 ．眼、耳道癤腫或化膿性疾病通常以無菌棉拭子直接采取分泌物送檢即可。

標(biāo)本的處理
標(biāo)本處理不當(dāng)將可能引起比分析更大的誤差。因此，應(yīng)根據(jù)分析目的選擇合適的抗凝劑、防腐劑和處理方法。
一、抗凝劑 
應(yīng)用物理或化學(xué)方法除去或抑制血液中的某些凝血因子，阻止血液凝固， 稱為抗凝。阻止血液凝固的化學(xué)試劑稱為抗凝劑。對抗凝劑的一般要求是用量少、溶解度大、不影響測定。生化檢驗常用的抗凝劑有以下幾種： 
1 ．肝素 
是一種含有硫酸基團(tuán)的粘多糖，其抗凝機(jī)理主要是對抗凝血活酶和凝血酶的形成和活性，阻止血小板聚集。肝素抗凝血常用于血氣分析和部分生化項目的測定， 使用 1．0g／L的肝素溶液 0．5 ml 可抗凝 5 ml 血液。 
2 ．草酸鉀－氟化鈉 
草酸鉀可與血中鈣離子生成草酸鈣沉淀，從而阻止血液凝固。草酸鉀溶解度大，抗凝作用強(qiáng)。氟離子能結(jié)合鈣而抗凝，但抗凝效果較弱。氟離子可抑制糖酵解中的烯醇化酶，防止糖酵解，若未加氟化鈉，血標(biāo)本中葡萄糖含量將以每小時 6 ％的速度下降。而在氟化鈉的存在下，血糖濃度在 25 ℃ 可穩(wěn)定 24 小時， 4 ℃ 可穩(wěn)定 48 小時。因此，草酸鉀－氟化鈉是血糖測定標(biāo)本常使用的抗凝劑。 
二、防腐劑 
尿液檢驗最好留取新鮮標(biāo)本及時檢查，否則尿液生長細(xì)菌，使尿液中的化學(xué)成分發(fā)生變化。在留取 24 小時或 12 小時尿液時，尿液標(biāo)本應(yīng)置冰箱保存或加入防腐劑（ antiseptic ），常用的防腐劑有： 
1 ．濃鹽酸 
鹽酸使尿液保持酸性，阻止細(xì)菌繁殖， 同時防止一些化學(xué)物質(zhì)因尿液堿化而分解，通常用量為 0．5～1．0 ml 濃鹽酸／100 ml尿液，適用于 24 小時尿兒茶酚胺、秀草扁桃酸（V M A）、17－羥皮質(zhì)類固醇和17－酮類固醇等定量測定。
2 ．甲苯 
甲苯可在尿液表面形成薄膜，防止細(xì)菌繁殖，用量 1．0 ～ 2．0 ml 甲苯／100 ml 尿液，適用于尿肌酐、尿糖、蛋白質(zhì)、丙酮等生化項目的測定。 
3 ．冰醋酸 
用量5～10 ml 冰醋酸／24 小時尿液，適用于 24 小時尿醛固酮測定。